免疫组化的开展被誉为病理学的“棕色革命”。自上个世纪七十年代中期试验成功以来,在短短的二十余年内便以其强大的生命力在全球病理学界普及开来。目前,即使在国内,也不仅仅限于大型医院,连许多基层医院也都开展了这项新技术。
一、 关于免疫组化的概念和原理
免疫组化是免疫组织化学技术的简称,在英语文献中也称其为免疫氧化酶技术。它是应用抗原抗体特异性结合的原理,使用已知的抗体在病理切片上使之与相应的抗原结合,然后把结合产物应用组织化学的方法显现出来,使之可以在显微镜下观察得以确认。通常使用的显色剂为联苯胺,结合的抗体显示为棕色颗粒,所以把免疫组化称为“棕色革命”。
我们已知组成人体的细胞分为若干种,如:上皮细胞、神经细胞、肌肉细胞、血细胞等,每种细胞都有其特殊的结构物质,每种细胞也都有其特异功能,每种功能又有其物质基础。如鳞状上皮细胞通过角化物可以防止机体水份的蒸发和外界病原微生物的侵入,肌肉可以通过肌动蛋白使自己收缩。突触素可以传导神经兴奋,某些器官借以实现其功能的激素受体,载有遗传物质的DNA片段——基因等,现在人们都可以把这些物质纯净地分离出来,并把它们作为抗原免疫大鼠或家兔,使之产生相应的抗体,人们再把每种抗体分离纯化,就得到了我们免疫组化应用的抗体。我们把这些抗体作用于病理切片,然后再用过氧化物酶及联苯胺染色,如果切片上有这种抗体对应的抗原就会在切片上出现棕色颗粒,如果没有棕色颗粒就说明没有这种抗体的抗原。因为每种抗体都是已知的,所以切片组织上有没有对应的抗原物质,在显微镜下就一目了然了。
二、 免疫组化的优点
1、 特异性强。因为免疫组化是应用抗体来检查抗原的,抗原抗体结合是高度特异性的,所以它只显示主要检验的物质。
2、 敏感性高。通过对组化技术的不断改进,现在对微量的抗原物质都能显示出来。
3、 应用范围广。现在生产的抗体已达几千种,凡是组织细胞内具有抗原性的物质都能通过免疫组化进行检查。
4、 廉价方便。免疫组化不需要庞大昂贵的设备,过程相对简便可靠,重复性强,所以一般病理实验室只要有较少的投入和相应的技术培训就可以完成。
三、 免疫组化应用举例
现将临床应用比较广泛,效果比较肯定的抗体举例如下:
1、 雌激素受体(ER),孕激素受体(PR)和癌基因C-ernb-2在乳腺癌诊治中的应用。
大量病例统计证明:ER和PR阳性的乳腺癌淋巴结转移率低,手术后复发率低,10年生存率高,内分泌治疗有效,而阴性者则相反。另外癌基因C-ernB-2阳性者,即使ER和PR阳性,预后和内分泌治疗也都大打折扣,阴性者则好。
2、 肿瘤多药耐药基因
在临床肿瘤治疗中,经常有这样的情况:同一种肿瘤,使用同一个治疗方案,或同一个病人,化疗之初和化疗后期,其效果迥异,这种情况的决定性原因是肿瘤细胞内是否存在或产生了多药耐药性。多药耐药基因编码的蛋白可以把化疗药从细胞内“泵”到细胞外,从而避免了化疗药对细胞的破坏。所以每一个化疗病人,在治疗前都应检查肿瘤的耐药性,如果阳性,可以使用逆转剂,提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性。
3、 通过转移癌寻找肿瘤的原发灶
临床上往往有这样的病例,最先发现的是转移癌,如颈部、腋下或腹股沟的淋巴结,或骨骼、肺部的转移癌,而原发灶隐匿查不出。过去有些病例至死也查不出原发癌,只能通过尸检才能确诊。现在通过免疫组化的特异性,很多病例很容易就找到了原发癌。
4、应用于某些特殊疾病的诊断,如尖锐湿疣。众所周知,尖锐湿疣是一种性传播疾病,它的确诊往往会引起家庭纠纷甚至家庭破裂。但是尖锐湿疣诊断的组织学指标又都不是特异性的,和某些炎症互有交叉,所以某些非典型病例就难于确诊。如果用免疫组化的方法,看其病变细胞内是否有乳头状病病毒就很容易解决了,甚至可以作为法律的证据。
还有很多抗体可以检查肿瘤细胞的增生速度和侵袭转移能力,或用于病理诊断和鉴别诊断,在此就不一一例举了。

